cDNA克隆库构建服务

技术原理

       cDNA克隆库是通过逆转录技术将mRNA群体转化为稳定的双链cDNA，并克隆至适当载体的基因资源库。CDNA文库在研究具体某类特定细胞中基因组得表达状态以及表达基因得功能鉴定方面具有特殊得优势，从而使它在个体发育，细胞分化，细胞周期调控。我们采用：
✔ 优化的oligo(dT)和随机引物引导的逆转录系统
✔ 高效的cDNA片段化与末端修复技术
✔ 先进的克隆策略（Gateway®、TA克隆等）
构建高覆盖度、高代表性的cDNA文库，为您的基因筛选、功能研究和蛋白表达提供优质资源。

专业构建流程

1. 样本准备与质检

       组织/细胞样本收取与处理

       RNA提取（提供＞100μg总RNA）

       RNA完整性检测（RIN≥8.0）

2. cDNA合成与处理

      第一链cDNA合成（SMART技术）

      双链cDNA合成与纯化

      片段分级（可选200bp-10kb范围）

3. 文库构建

     载体连接（提供λ噬菌体、质粒等系统）

     电转化/包装（效率＞1×10⁶ CFU/μg）

     初级库扩增与保存

4. 质量检测

     库容量测定（＞1×10⁶独立克隆）

     插入片段分析（平均1.5-3kb）

     代表性检测（看家基因PCR验证）

5. 交付内容

     冻存克隆库（甘油菌或噬菌体颗粒）

     配套宿主菌株

     完整质检报告

核心竞争优势

      ✔ 超高覆盖度：采用SMART技术，可捕获低丰度转录本
      ✔ 多样化选择：

      组织/器官特异性文库（脑、肝、肿瘤等）

      发育时期特异性文库

      应激/处理条件特异性文库

✔ 灵活载体系统：

      表达型（pCMV、pET等）

      筛选型（酵母双杂交、噬菌体展示）

      定制化载体需求

✔ 严格质控标准：

      每个文库≥1×10⁶独立克隆

      插入率＞95%

     平均插入片段≥1.5kb

✔ 增值服务：

    文库扩增与分装

    高通量测序验证

    特定基因筛选服务