环状RNA

        circRNA（circular RNA，环状RNA）是一类具有闭合环状结构的非编码RNA分子，没有5′ 帽子结构和3′ poly（A）结构，主要位于细胞质或储存于外泌体中，不受RNA外切酶影响，表达更稳定且不易降解，因而比线性RNA更稳定，更具有保守性。

图1：circRNA发展历程

一、circRNA形成的3种方式

   不同于线性RNA的标准剪切模式，circRNA是通过外显子或内含子反向剪接mRNA前体形成的，circRNA的形成方式包括外显子环化和内含子环化。

图2：circRNA形成的3种方式

二、circRNA的3大功能

1. miRNA海绵功能：根据碱基的互补配对法则,RNA之间可以通过竞争的方式结合共同的miRNA来影响miRNA对靶基因的抑制作用，这一类RNA称为竞争性内源RNA(competing endogenous RNA，ceRNA)，包括mRNA、假基因和lncRNA。circRNA含有miRNA结合位点且结构稳定，可以作为高效的ceRNA与miRNA结合，发挥miRNA海绵功能，有效地抑制miRNA与靶基因非翻译区的结合，从而实现对靶基因的调控作用。此外，有些circRNA可以与多个miRNA结合，影响多种基因的调控。
2. 调节转录：有些circRNA可与转录因子结合调控基因的转录。EciRNA可以与细胞内某些蛋白质分子特异性结合, 结合mRNA可以分析circRNA的作用位点，作为脚手架 (Scaffold) 与RNA或DNA结合, 为RNA结合蛋白（RBP）、RNA、DNA之间互作提供平台。circRNA与RNA聚合酶Ⅱ相互作用并调节转录，或者ElcircRNA可与小核糖核蛋白互作用，再与RNA聚合酶Ⅱ结合。
3. 蛋白质翻译：circRNA缺乏帽依赖性翻译的必需元件，如5'帽和polyA尾，因此，一般情况下被认为不具备翻译的功能。但是近年来随着对circRNA的进一步的研究,发现有少数的circRNA含有内部核糖体进入位点序列（IRES）使其具备了翻译能力，进而行使调控功能。

图3：circRNA的3大功能

三、CircRNA载体构建与病毒包装：汉一生物将环化框装入载体中，构建成功了大量circRNA表达载体，并建立了腺病毒、慢病毒和AAV全套circRNA过表达和干扰载体的系统。

1）circRNA过表达和干扰质粒构建

2）circRNA过表达和干扰病毒包装

3）基于慢病毒技术的稳定细胞系构建服务

4）circRNA和靶基因的荧光素酶验证服务

图4：部分载体图谱